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选择真核和细菌细胞储存冷冻保护剂

时间:2019-10-31 09:09来源:未知 作者:班德澳门皇冠技巧 点击:
冷冻保护剂的实验室选择为真核生物和细菌细胞保存的长期储存可以具有用于将来的实验结果产生深远的影响。抗冻剂,字面意思是“保护细胞和组织造成的损害冻结”,可以人为的,或者在本质上产生的。例如,植物和动物的一些种类产生防冻特性的物质,以帮助他们渡过寒冷的环境。糖海藻糖是一种这样的化合物,并正在测试作为实验室使用冷冻保护剂的选择。澳门皇冠技巧
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用于低温储存箱瓶

这些细胞监护人通常配制与其它物质如蒸馏水,乙二醇和/或牛血清以创建一个理想的配方为冻结。冷冻保护剂被分为两类:细胞外和细胞内。胞外冷冻保护剂被非穿透通过减少发生高渗细胞裂解功能的分子在冷冻过程中。胞内冷冻保护剂穿透细胞膜,并防止冰晶,其破裂细胞膜的形成。这里我们讨论在核/含细胞器的真核细胞的冷冻保存用这些解决方案的影响,和更简单的结构的细菌细胞。

冷冻保护剂外

胞外冷冻保护剂不穿透的真核细胞或细菌细胞壁的膜。因为这个原因,它们不能防止发生细胞内水的晶体形成的结果细胞膜破裂。这些非穿透分子??的实例是蔗糖,右旋糖和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。与细胞样品和冷冻保护剂小瓶

相反,这些分子的作用,以减少形成通过冷冻过程样品过渡高渗梯度。作为较少的水可充当细胞外溶质,盐浓度急剧增加。对细胞的增加的渗透压引起细胞形状的改变,细胞相互作用,分子的亚细胞分布,并**终细胞活力。

胞外冷冻保护剂的存在下用于平衡渗透压差和防止水的流出从细胞。并且,由于这些分子不穿透膜,它们不具有在细胞生理学一个直接的,有害的影响。

细胞内冷冻保护剂

胞内冷冻保护剂,如二甲基亚砜(DMSO)和甘油,已成为冷冻保存支柱试剂。这两种分子具有穿透细胞膜,以减少在冷冻过程中水的晶体的小区内的形成的能力。要使用这些试剂时,保持细胞活力,冻结协议必须是缓慢和控制,从而出现水外排。
为细胞样品的存储绝热低温容器 为细胞样品的存储绝热低温容器如果过程过快,在细胞内的冰晶会形成前的水能够退出细胞。而DMSO和甘油分别具有被传统用于真核生物和细菌细胞的冷冻保存,还存在着缺点这种方式。在某些情况下这两种分子在相同的蛋白质逆效应。此外,不同的细胞类型对这些分子不同的透气性。这种差异会影响在哪些小区收缩和冷冻,冷冻过程中前膨胀,并且在解冻循环的速率。这可能对细胞活力显着的影响。因此,人们需要密切考虑到使用的冷冻保护剂存在的类型和浓度。文献针对您的细胞类型和小规模试验标准操作规程仔细分析可以节省不必重复漫长的实验作为冷冻保存不佳的情况而受挫和成本。澳门皇冠技巧

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